【MTT 实验】 [原创]

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实验简介

MTT实验步骤

参考文献


                        

实验原理

活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在540 或720nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

安全性

主要试剂/材料

酶标仪 1
MTT 5mg/ml 1.5ml
DMSO 市售 15ml

【MTT 实验】的实验步骤

第1步

铺板:将细胞按5000-6000个/100μL/孔 铺于96孔板中,于5%CO2孵箱中孵育。

第2步 (仅上传部分浓度的照片)

给药:孵育过夜,待细胞贴壁,按设置好的药物浓度梯度给药,继续孵育24-48h。

第3步 (MTT 要避光哦!)

加MTT:每孔加入20μL MTT,继续孵育4-6h,以生成甲瓒。

第4步

检测:将孔里的液体全部吸出,加入DMSO 200μL/孔,于100 rpm摇床上摇晃10-15 min,使甲瓒溶解,置于酶标仪上检测。

实验结果

细胞生存率=(A实验组-A空白组)/(A对照组-A空白组)

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