【动物组织中总胆固醇的测定(GPO-PAP法)】 [原创]

点击一下选项,对此实验进行评价(0

挺好
0
一般
0
0.00
综合评分


实验简介

总胆固醇的测定方法目前已超过200种,可分为化学试剂比色法、酶分析法、荧光法、气相和高效液相色谱 法等五大类。由于气相和高效液相色谱法条件高,临床实验室最常用的是化学试剂法和酶法。
总胆固醇是指血液中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。人群总胆固醇水平主要取决于遗传因素和生活方式。总胆固醇包括游离胆固醇和胆固醇酯,肝脏是合成和贮存的主要器官。胆固醇是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的重要原料,也是构成细胞膜的主要成分,其血清浓度可作为脂代谢的指标。总胆固醇是指血液中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。人群总胆固醇水平主要取决于遗传因素和生活方式。总胆固醇包括游离胆固醇和胆固醇酯,肝脏是合成和贮存的主要器官。胆固醇是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的重要原料,也是构成细胞膜的主要成分,其血清浓度可作为脂代谢的指标。

参考文献


                        

实验原理

胆固醇酯在胆固醇酯酶作用下生成游离胆固醇和脂肪酸。游离胆固醇在胆固醇氧化酶作用下生成胆烷-4-烯-3-酮和过氧化氢,过氧化氢与4-氨基氨替比林和酚在过氧化物作用下生成红色的苯醌亚胺。

安全性


                                            

主要试剂/材料

721分光光度计 1
试剂盒 1
试管 若干

【动物组织中总胆固醇的测定(GPO-PAP法)】的实验步骤

第1步

实验试剂:
目前已经有很多公司提供配制好的试剂,而且价格比较便宜,因此在测此指标时,可直接没现成的试剂盒,可节省大量的时间,而且结果比较准确,本实验试剂购自于南京建成生物工程研究所。试剂盒主要包含工作液和标准品,如图所示

第2步

样本处理:
(1)血清(浆):直接测定,如果过大,可以稀释后测定。
(2)细胞培养液:收集细胞培养液,1000r/min,离心,取上清直接测定。
(3)组织样本:取组织,制备10%的组织匀浆,3000r/min离心,取上清测定,同时测定组织中的蛋白含量。

第3步

总胆固醇含量测定:
(1)如图所示,先后加入需要加的试剂,混匀,37摄氏度处理10min,然后510nm处,光径1cm比色皿(用体积1mL的比色皿),测定吸光度值。
(2)胆固醇含量(mM)= (A测定-A空白)/(A标准-A空白)X 5mM。

实验结果

如图所示,不同处理情况下,血清中总胆固醇的变化。

相近实验

知造署·知匠榜 查看全部>

  • 忍冬 | 1关注

    26实验  2659积分

  • 四叶草 | 4关注

    21实验  2299积分

  • 文荣 | 1关注

    21实验  2204积分

  • joydes | 8关注

    13实验  2200积分

  • susu001 | 15关注

    17实验  2193积分

知造署·大师

  • 研之成理 | 10关注

    64实验  1002616积分

  • 物理所公号君 | 3关注

    6实验  1000172积分

  • 温州优墨生物科技有限公司 | 0关注

    1实验  1000126积分

  • xiangyongwang08 | 3关注

    1实验  1000046积分

  • eavolong | 3关注

    0实验  1000021积分

  • 蜗牛 | 0关注

    0实验  1000020积分

  • 石长灿 | 0关注

    0实验  1000020积分

  • fanhbu | 0关注

    0实验  1000020积分

  • sunlianfeng | 0关注

    0实验  1000020积分

  • 日立扫描电镜工程师 | 0关注

    0实验  1000020积分