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动物组织中过氧化氢测定

过氧化氢是一种活性氧代谢的副产物,在许多氧化应急反应中过氧化氢都是一种关键的调节因子。过氧化氢可以激活NF-κB等因子,这些过氧化氢相关的信号途径和哮喘、炎症性关节炎、动脉硬化以及神经退行性疾病等许多疾病相关。过氧化氢也和细胞凋亡、细胞增殖等密切相关。

文荣 2018-02-24 16:37 浏览数67

生命科学动物学实验动物学

动物组织中总抗氧化能力(T-AOC)测定-FRAP法

机体中存在多种抗氧化物,包括抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶等,可以清除体内产生的各种活性氧,以阻止活性氧诱导的氧化应激(oxidative stress)的产生。一个体系内的各种抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶的总的水平即体现了该体系内的总抗氧化能力。因此测定血浆、血清、尿液、唾液等各种体液,细胞或组织等裂解液中的总抗氧化能力具有非常重要的生物学意义。

文荣 2018-02-24 15:51 浏览数59

生命科学动物学实验动物学

动物组织中碱性磷酸酶(AKP)测定

血清碱性磷酸酶正常人血清中的碱性磷酸酶主要来自肝和骨骼,碱性磷酸酶测定主要用于诊断肝胆和骨骼系统疾病,是反映肝外胆道梗阻、肝内占位性病变和佝偻病的重要指标。 原理:碱性磷酸酶分解磷酸苯二钠,产生游离酚和磷酸,酚在碱性溶液中与4-氨基安替比邻作用铁氰化钾生成红色醌衍生物,根据红色的深浅测定酶活力的大小。

文荣 2018-02-24 12:10 浏览数87

生命科学动物学实验动物学

血清中直接胆红素测定(化学氧化酶标法)

直接胆红素(DBil)又称结合胆红素,是由间接胆红素进入肝后受肝内葡萄糖醛酸基转移酶的作用与葡萄糖醛酸结合生成的。直接胆红素溶于水,与偶氮试剂呈直接反应,能通过肾随尿排出体外。肝脏对胆红素的代谢起着重要作用,包括肝细胞对血液中间接胆红素的摄取、结合和排泄三个过程。血清直接胆红素的升高,说明经肝细胞处理后胆红素从胆道的排泄发生障碍。直接胆红素的测定有助于黄疸类型的诊断和鉴别诊断。

文荣 2018-02-24 10:40 浏览数78

生命科学动物学实验动物学

动物组织中还原性谷胱甘肽(GSH)测定

谷胱甘肽广泛存在于动、植物中,在生物体内有着重要的作用。在面包酵母、小麦胚芽和动物肝脏中的含量很高,达100~1000mg/100g,在人体血液中含26~34mg/100g,鸡血中含58~73mg/100g,猪血中含10~15mg/100g,在西红柿、菠萝、黄瓜中含量也较高(12~33mg/100g),而在甘薯、绿豆芽、洋葱、香菇中含量较低(0.06~0.7mg/100g)。 机体新陈代谢产生的过多自由基会损伤生物膜,侵袭生命大分子,加快机体衰老,并诱发肿瘤或动脉粥样硬化的产生。谷胱甘肽在人体内的生化防御体系起重要作用,具有多方面的生理功能。它的主要生理作用是能够清除掉人体内的自由基,做为体内一种重要的抗氧化剂,保护许多蛋白质和酶等分子中的巯基。GSH的结构中含有一个活泼的巯基-SH,易被氧化脱氢,这一特异结构使其成为体内主要的自由基清除剂。例如当细胞内生成少量H2O2时,GSH在谷胱甘肽过氧化物酶的作用下,把H2O2还原成H2O,其自身被氧化为GSSG,GSSG由存在于肝脏和红细胞中的谷胱甘肽还原酶作用下,接受H还原成GSH,使体内自由基的清除反应能够持续进行。

文荣 2018-02-23 22:09 浏览数56

生命科学动物学实验动物学

动物组织中谷胱甘肽-S转移酶活性的测定

谷胱甘肽S-转移酶是指催化具有亲电取代基的外源性化合物与内源的还原谷胱甘肽(GSH)反应的酶。 可催化多种反应包括烃基、芳基、芳烃基、烯基和氧基的转移反应。 谷胱甘肽S-转移酶有多种形式,根据作用底物 不同,至少可分为下列5种: 1、谷胱甘肽S-烷基转移酶:催化烷基卤化物和硝基烷类化合物的谷胱甘肽结合反应。主要存在于肝脏和肾脏。 2、谷胱甘肽S-芳基转移酶:主要催化含有卤基或硝基的芳烃类或其它环状化合物的谷胱甘肽结合反应,如溴苯和有机磷杀虫剂等。该酶主要存在于肝脏胞液。 3、谷胱甘肽S-芳烷基转移酶:催化芳烷基的谷胱甘肽结合反应,例如,苄基氯等芳烷卤化物等。主要存在于肝脏和肾脏。 4、谷胱甘肽S-环氧化物转移酶:催化芳烃类和卤化苯类等化合物的环氧化物衍生物与谷胱甘肽结合,主要存在于肝肾胞液。 5、谷胱甘肽S-烯烃转移酶:催化含有α,β-不饱合羰基的不饱合烯烃类化合物与谷胱甘肽的结合反应,主要存在于肝肾胞液。 谷胱甘肽S-转移酶在毒理学上有一定的重要性。它可以催化亲核性的谷胱甘肽与各种亲电子外源化学物的结合反应。许多外源化学物在生物转化第一相反应中极易形成某些生物活性中间产物,它们可与细

文荣 2018-02-23 18:22 浏览数66

生命科学动物学实验动物学

动物组织中总超氧化物歧化酶(SOD)活性测定(WST-1法)

超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase简称SOD)是一种新型酶制剂。它在生物界的分布极广,几乎从动物到植物,甚至从人到单细胞生物,都有它的存在。SOD被视为生命科技中最具神奇魔力的酶、人体内的垃圾清道夫。SOD是氧自由基的自然天敌,是机体内氧自由基的头号杀手,是生命健康之本。

文荣 2018-02-23 16:45 浏览数96

生命科学动物学实验动物学

不同方法检测细胞凋亡的分析

胞凋亡是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用;1965年澳大利亚科学家发现,结扎鼠门静脉后,电镜观察到肝实质组织中有一些散在的死亡细胞,这些细胞的溶酶体并未被破坏,显然不同于细胞坏死。这些细胞体积收缩、染色质凝集,从其周围的组织中脱落并被吞噬,机体无炎症反应。1972年Kerr 等三位科学家首次提出了细胞凋亡的概念,宣告了对细胞凋亡的真正探索的开始,在此之前,关于胚胎发育生物学、免疫系统的研究,肝细胞死亡的研究都为这一概念的提出奠定了基础。

文荣 2018-02-09 18:54 浏览数72

生命科学细胞生物学细胞凋亡

内毒素浓度检测

内毒素是由多糖、脂质和蛋白质组成的复合体。脂多糖又由化学和生物性质不同的特异O 抗原、核心多糖和类脂A 组成。类脂A 位于最外层, 是以脂化的葡萄糖胺二糖为单位, 通过焦磷酸酯键组成的一种独特的糖脂化合物, 是主要的活性成分。特异O 抗原向外由若干个低聚糖的重复单位组成的多糖链, 具有特异性。核心多糖又分为内核心和外核心。外核心由数种己糖, 包括葡萄糖、半乳糖、乙酰氨基葡萄糖等组成。内核心由庚糖及特殊的3 - 脱氧-D - 甘露糖- 辛酮糖(KDO) 组成。KDO 以酮糖键与类脂A的氨基葡萄糖连接。

文荣 2018-02-09 18:15 浏览数77

生命科学微生物学细菌

如何用酶标仪检测核酸浓度

核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,为生命的最基本物质之一。核酸广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内,生物体内的核酸常与蛋白质结合形成核蛋白。不同的核酸,其化学组成、核苷酸排列顺序等不同。根据化学组成不同,核酸可分为核糖核酸(简称RNA)和脱氧核糖核酸(简称DNA)。DNA是储存、复制和传递遗传信息的主要物质基础。RNA在蛋白质合成过程中起着重要作用⸺其中转运核糖核酸,简称tRNA,起着携带和转移活化氨基酸的作用;信使核糖核酸,简称mRNA,是合成蛋白质的模板;核糖体的核糖核酸,简称rRNA,是细胞合成蛋白质的主要场所。 核酸浓度定量检测手段常用紫外光吸收法和荧光法两种,而使用这两种检测方法的常见仪器主要是分光光度计和酶标仪。

文荣 2018-02-09 17:20 浏览数149

生命科学分子生物学PCR技术

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